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首先，研究者利用光遗传学结合GRAB-5HT传感器证实，胆碱能中间神经元（CINs）的同步激活足以独立驱动背侧纹状体内的5-HT释放。这一过程由α4β2型烟碱型乙酰胆碱受体（nAChRs）直接介导，且乙酰胆碱直接作用于5-HT神经纤维，无需经过GABA、谷氨酸或多巴胺系统的中转。
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最后，此外，通过拮抗剂RS 23597-190及SSRI类药物西酞普兰的测试，进一步验证了该传感器对5-HT信号捕获的特异性及受突触前自身受体调控的动力学特征。
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